云南中医药大学大鼠乳腺组织病理检测测试化验加工服务采购比价公告

项目名称：大鼠乳腺组织病理检测

采购单位：云南中医药大学

完成时限：2019年5月30日前

项目预算：17.34万元

完成时限：第一批4月底前，其他的按照学校要求分批实施。

采购内容及要求：以下所有检测所需试剂、免疫组化检测试剂盒、耗材等均由拟定的唯一供货商提供，并对所有检测结果出具检测结论。

一、病理切片：200例：大鼠体表有明显结节和筛查后发现结节的大鼠，消毒结节及周围皮肤，切开皮肤，观察肿块包膜及切面情况。

要求：用灭菌生理氯化钠溶液清洗数次，滤纸吸干表面水分，剔除其表面脂肪组织后，随后置于体积分数为 10%的福尔马林固定液中，取材行石蜡包埋，切片厚度 4μm，进行苏木精-伊红（HE）染色后于光镜下检查。（大鼠乳腺组织病理学诊断标准(参考 2003 年新版 WHO 乳腺肿瘤分类标准)：

二、ER、PR 受体表达检测：200例

要求:由病理科购买免疫试剂盒，取大鼠包块组织常规甲醛固定，梯度乙醇脱水，石蜡包埋切片，切片厚5μm。常规HE染色，Olympus光学显微镜观察肿瘤组织病理学变化，再运用兔抗鼠ER单克隆抗体运用和兔抗鼠 PR 单克隆抗体，光学显微镜下观察 ER、PR的阳性面积及平均光密度。

三、C-erB-2、Ki67 检测：200例

要求：免疫组化法组织切除标本立即以10%中性福尔马林液固定，石蜡包埋，常规切片(5μm厚),HE染色。免疫组化采用 Envision二步法，所用试剂:鼠抗人C-erB-2单克隆抗体(CB11)，鼠抗人 Ki67 单克隆抗体(MIB-1)。采用SP免疫组化法进行检测，DAB显色。染色程序严格按照试剂盒说明书要求进行。用PBS代替一抗作阴性对照，用已知阳性切片作阳性对照。

四、PCNA 检测：200例

要求：采用链霉菌抗生物蛋白过氧化物酶链接法(SP 法),行免疫组织化学检测。步骤如下:所有标本经 40 g/L 甲醛固定，常规脱水、透明、浸蜡，石蜡包埋，切片厚 4 um；二甲苯脱蜡，梯度乙醇至水化后高压锅热处理 5-8min,过氧化物酶阻断血清封闭，加一抗孵育，4℃过夜，接着加二抗及过氧化物酶标记的链霉菌抗生物素蛋白。其余步骤按 SP 试剂盒操作步骤进行，DAB 显色，苏木素复染。免疫组化染色用 PBS 代替一抗作阴性对照，以试剂商提供的阳性片作为阳性对照。

五、PTEN 检测：200例

要求：SP 免疫组化法检测乳腺癌患者中突变型和 PTEN 的表达情况。石蜡包埋组织 4μm 厚切片,常规脱蜡至水,3%H2O2 室温下 10 min,以阻断内源性过氧化物酶；充分水洗，于 pH6.0 的柠檬酸缓冲液中高压锅处理 10 min，室温冷却；非免疫羊血清封闭 10 min 后,加入即用型抗体,4℃冰箱过夜,再加入生物素化羊抗鼠 IgG 和 SP 复合物。以 DAB 液显色，苏木精复染，常规脱水，透明，封片。

六、TUNEL法细胞凋亡的原位检测： 200例

要求：TUNEL 法细胞凋亡的原位检测：按照试剂盒说明进行，用PBS代替enzyme液作阴性对照,以已知阳性肝脏凋亡组织作阳性对照。结果判断：细胞核呈棕黄色为TUNEL阳性细胞。每张切片选 10 个视野，计数 1000个肿瘤细胞中阳性细胞所占的百分比。用图像分析仪计数，分析。

七、P53、bcl-2 检测：200例

要求：将乳腺癌组织做成 4μm 连续切片，以中性 0.9%甲醛

固定,常规石蜡包埋。用Bcl-2、P53单克隆抗体、免疫组化试剂盒采用免疫组化的方法,按照试剂盒的操作步骤进行。用已知阳性染色的乳腺癌切片为阳性对照片,用 PBS 代替一抗作阴性对照。

报价要求：请具有完成以上检测服务加工项目资质及能力的潜在报价人，在2019年4月4日下午17：00时将报价报至云南中医药大学资产处。

报价方式：自制并填写报价表，签字盖章，彩色扫描后按时发至指定邮箱或将原件送至云南中医药大学资产处办公室（呈贡校区崇德楼219室）。联系人：董璐，联系电话：65919731，邮箱：408037266@qq.com.

比价表.xls

云南中医药大学资产处

2019年4月2日